葡萄糖耐量试验（GTT）对糖尿病具有很大的诊断价值。对空腹糖正常或可疑升高，以及餐后2小时血糖可疑升高等有糖尿病怀疑的患者，都不能完全肯定或否定糖尿病，均必须依赖葡萄糖耐量试验才能做出最后诊断。临床葡萄糖耐量试验有口服葡萄糖耐量试验（OGTT）、静脉葡萄糖耐量试验（IGTT）、甲磺丁脲试验、皮质素葡萄糖耐量试验等方法，共中以口服葡萄糖耐量试验最为常用。
1.口服葡萄糖耐量试验（OGTT）
机理：正常人服葡萄糖后几乎全部被肠道吸收，使血糖迅速上升，并刺激胰岛素分泌，肝糖原合成增加、分解受抑制，肝糖原办理出减少，体内组织对葡萄糖的利用增加。服葡萄糖后30～60分钟血浆血糖达到最高峰（峰值＜200mg/dL）以后迅速下降，在2小时左右下降到接近正常水平，3小时血糖降至正常。糖尿病时，耐糖功能低下，服葡萄糖因糖峰值超过正常，多≥200mg/dL，且高峰延迟，2小时也不能下降到正常。
方法：试验前3天，每天的碳水化合物摄入量不少于150克。试验开始前10～16小时停止进食，但可以饮水。试验最好从早晨6～8点进行，先取空腹血标本测空腹血糖，然后将75克葡萄糖溶于250～300毫升水中，在5分钟内喝完（儿童服葡萄糖量可按每公斤体重 1.75克计算），总量不超过75克；对于糖尿病人，为减少对β细胞的强烈刺激，可以进食2两左右的（约100克）馒头代替葡萄糖，随即在服糖后30分钟，60分钟，120分钟，180分钟再分别取血留标本测血糖。在留血液标本的同时，每次均收集尿液，检查尿糖。
正常值：各时项的正常血浆血糖的上限定为：空腹125mg/dL（6.9mmoL/）、服糖后30分钟 190mg/dL（10.5mmol/L）、60分钟180mg/dL（10.0mmoL/L）、120分钟140mg/dL（7.8mmoL/L）、 180分钟125mg/dL（6.9mmoL/L）。50岁以上者，每长10岁，又可分别在30分钟、60分钟、120分钟各增加5mg/Dl、 10md/dL、5mg/dL.
口服葡萄糖耐量诊断标准：把服糖后30分钟或60分钟血糖值做为1点其他各时限血糖值（空腹、2小时、3小时、）为3点，共4点。若4点中有3点大于上述各时项上限者，则诊断为糖尿病。若4点中有2点达到或高于上述正常上限，为糖耐量减低，属于可疑病例，需长期随访。糖耐量减低，虽不诊断为糖尿病，但在临床上可按糖尿病对待。
2.静脉葡萄糖耐量试验（IGTT）
对于胃肠功能吸收异常，有胃肠疾病者，如胃手术后胃肠吻合而吸过快或由于慢性腹泻影响胃肠的吸收等各种情况，用OGTT已不合适，可采用IGTT.其方法是，用25%或50%葡萄糖注射液，每公斤体重0.5克，在2～4分钟内静脉推注完毕。从开始注射时计算起，每30分钟取血一次，共2～3小时。正常人在2小时内血糖下降至正常范围，若2小时血糖超过正常值，表示有糖耐量减低。
3.甲磺丁脲试验（D860试验）
口服葡萄糖耐量减低者，未必一定是糖尿病，尤其是轻度减低，亦可见了于肥胖症、肝病、甲状腺机能亢进症等。为了进一步确诊糖尿病，可进行甲磺丁脲试验。甲磺丁脲能刺激胰岛素分泌，可利用甲磺丁脲刺激胰腺，观察分泌胰岛素的情况。凡糖尿病者尤其是幼年型对此反应迟钝，血糖下降缓慢，而正常人以及非糖尿病所致糖耐量减低者，胰岛功能正常，往往有明显的血糖下降，且出现早和恢复快。二者的血糖曲线显然不同，可以此鉴别。
4.皮质素葡萄糖耐试验
对于以上所述试验尚不能确诊的糖尿病可疑病例，可采用本试验，给予小剂量的糖皮质激素，使患者处于应激状态，观察患者对葡萄糖反应是否降低。糖尿病时，对葡萄糖的反应往往降低。如在OGTT出现异常前，给予口服可的松50毫克二次后再做OGTT，做为激发试验可使糖尿病的诊断明显。所给的可的松剂量在正常人不会引起血糖的较大变化，但在有糖尿病家族史者中，可出现异常高血糖。据国外Fajans发现，在无糖尿病家族史人群中，该试验阳性率为3%；在有家族史但无糖尿病症状的人群中，阳性率为25%；而那此可能为糖尿病患者中，阳性率高达88%.
